期刊简介

               本刊是由江西省卫生厅主管,江西省医学会主办的大型综合性医学检验专业期刊,是广大检验和从事科学实验人员提高专业水平,开展学术交流,展示科研成果的专业权威媒体,已被全国各大数据库所收录。本刊包括检验医学理论和检验技术,是本刊的重点和特点所在。“实验医学”涵盖所有与医学有关的实验理论与实践,包括医学方面各种与其相关专业。本刊将积极宣传“实验与检验医学”的新理论、新技术、新经验、新成果,为繁荣学术园地做出新贡献。                

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  • 杂志名称:实验与检验医学杂志
  • 主管单位:江西省卫生厅
  • 主办单位:江西省医学会
  • 国际刊号:1674-1129
  • 国内刊号:36-1298/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:2008年经全国医学期刊协作网专家综合评审为“全国优秀医学期刊”期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
实验与检验医学杂志2013年第05期

改进的Coca's液提取户尘螨过敏原蛋白的效果探究

刘小萍;王莉;吴善东

关键词:尘螨, 提取方法, 过敏原, ELISA
摘要:目的 采用改进的Coca'8液提取户尘螨螨体中的蛋白,提高提取液的蛋白浓度和过敏原蛋白的效价.方法 (1)细胞破碎:取样品于研钵内,液氮反复冻融4次,每次间隔10min,在研钵内反复研磨冻融后的样品.(2)蛋白提取:在离心管中加入10mlCoca's液,4℃匀速搅拌4h后置于4℃冰箱过夜.(3)离心:4℃,5000×g离心1h,取上清液备用.(4)测提取蛋白的浓度:Bradford Reagent法测其提取蛋白的浓度.(5)SDS-PAGE电泳:参照Tricine-SDS-PAGE配制10%分离胶和4%浓缩胶,上样10μL.(6)采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行本研究获得的提取液与进口户尘螨过敏原蛋白产品的功能性比较.结果 本研究中户尘螨过敏原蛋白提取液的蛋白浓度为3.0 mg/ml,远高于美国ALLERMED公司产品的0.35mg,/ml;且电泳图显示包含分子量为25kDa、14kDa的户尘螨主要过敏原蛋白Der p 1、Der p 2条带,蛋白浓度也高于美国ALLERMED公司产品相应的条带;功能性实验中也表明本研究中户尘螨过敏原蛋白提取液的免疫效价也显著高于美国ALLERMED公司产品.结论 可以用本研究的方法来大量提取户尘螨过敏原蛋白,提取液可替代进口产品,用作户尘螨过敏原检测试剂的生产原料或用于户尘螨过敏原皮试、点刺及脱敏治疗等,降低这些产品的生产成本,进而降低国内户尘螨过敏的诊疗费用.